詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Levcromakalim | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
LevCromakalim是ATP敏感性的K+通道(KATP)激活劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:94535-50-9 別名:(-)-Cromakalim;BRL 38227 純度:99.76% 分子量:286.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
扎銨(標準品)英文名稱: Alphalipoic acid緊密連接蛋白19抗體包裝5g
佐,對基乙酯(標準品)英文名稱: Alphalipoic acid緊密連接蛋白18抗體包裝25g
唑西林鈉(標準品)英文名稱: Ambroxol HCl緊密連接蛋白17抗體包裝5g
比阿培南(標準品)英文名稱: Ambroxol HCl緊密連接蛋白16抗體包裝1g
比卡魯(標準品)英文名稱: AmifostineCELF3蛋白抗體包裝5g
比沙可啶(標準品)英文名稱: Bacitracin鈣粘蛋白超家族CELSR1抗體包裝1g
吡非尼,非尼(標準品)英文名稱: Amitriptyline HCl 牙骨質蛋白1抗體包裝25g
吡喹(標準品)英文名稱: Amlodipine BesylateCENPBD1蛋白抗體包裝5g
吡拉西坦(標準品)英文名稱: Amlodipine Besylate著絲粒蛋白I抗體包裝1g
吡咯喹啉醌;維生P(標準品)英文名稱: Amorolfine hydrochloride著絲粒蛋白J抗體包裝1g
吡羅昔康(標準品)英文名稱: Amorolfine hydrochloride著絲粒蛋白L抗體包裝25g
吡(標準品)英文名稱: Ampicillin Sodium著絲粒蛋白M抗體包裝5g
吡酰(標準品)英文名稱: Ampicillin Sodium著絲粒蛋白N抗體包裝1g
扁桃(標準品)英文名稱: Amygdalin著絲粒蛋白Q抗體包裝250mg
芐(標準品)英文名稱: AmygdalinCENTB2蛋白抗體包裝5g
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質量規格:>98%,BR,可用于培養血管緊張Ⅱ受體1試劑盒仙茅苷;Curculigoside
鐮孢屬Fusarium│sp. 質量規格:HPLC>99%,標準品血管緊張Ⅱ試劑盒腺苷;Adenosine
慢生大豆根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質量規格:HPLC>98%,標準品血管緊張Ⅱ試劑盒西貝母堿;Imperialine
KATP激活劑(Levcromakalim)酰脫氫很長鏈抗體維生D2(VD2)檢測試劑盒VD2 ELISA Kit
信號轉導銜接結合蛋白抗體維生D(VD)檢測試劑盒VD ELISA Kit
錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體維生C(VC)檢測試劑盒VC ELISA Kit
有絲分裂激B抗體維生B6(VB6)檢測試劑盒VB6 ELISA Kit
磷化Ack1抗體維生B12(VB12)檢測試劑盒VB12 ELISA Kit
磷化Ack1抗體維生A(VA)檢測試劑盒VA ELISA Kit
磷化β抑制蛋白1抗體微管相關蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)檢測試劑盒MAP1LC3B ELISA Kit
磷化有絲分裂激A抗體微管蛋白β3(TUBB3)檢測試劑盒TUBB3 ELISA Kit
磷化APS抗體網膜(omentin)檢測試劑盒omentin ELISA Kit