Jurkat CA人急性T細胞白血病細胞系
Jurkat CA人急性T細胞白血病細胞系源于急性 T 細胞白血病患者的外周血,是研究白血病發(fā)病機制、開發(fā)新型治療方法的經典細胞模型。在顯微鏡下觀察,Jurkat CA 細胞呈典型的淋巴細胞形態(tài),多為圓形或橢圓形,以懸浮狀態(tài)均勻分布于培養(yǎng)液中,細胞大小較為均一,直徑約 8 - 12 微米。細胞胞質較少,染色后呈淡嗜堿性,內部細胞器以線粒體、核糖體為主,線粒體為細胞代謝提供能量,核糖體參與蛋白質合成;細胞核大而圓,占據細胞體積的大部分,染色質呈細顆粒狀,核仁明顯,部分細胞可見異常的多極核分裂象,這正是其作為惡性腫瘤細胞的直觀體現。
Jurkat CA 細胞具有鮮明的生物學特性。其增殖能力異常活躍,細胞周期進程加快,Cyclin D3、CDK6 等細胞周期蛋白及其依賴性激酶的高表達,驅動細胞快速通過 G1 期進入 S 期,在適宜培養(yǎng)條件下,細胞倍增時間僅為 24 小時左右。細胞內的 TCR - CD3 信號通路、PI3K/AKT 信號通路持續(xù)激活,TCR - CD3 信號通路激活后,通過 ZAP - 70、Lck 等激酶的級聯(lián)反應,激活下游的 NF - κB、AP - 1 等轉錄因子,調控細胞增殖、存活相關基因的表達;PI3K/AKT 通路則通過抑制促凋亡蛋白 Bad、激活 mTORC1,增強細胞代謝活性并抑制細胞凋亡。此外,Jurkat CA 細胞表面高表達 CD3、CD4 等 T 細胞特異性抗原,同時表達一些腫瘤相關抗原,如 CD25(IL - 2 受體 α 鏈),其異常高表達不僅參與細胞的自分泌生長刺激,還與腫瘤細胞的免疫逃逸相關,使得 Jurkat CA 細胞能夠躲避機體免疫系統(tǒng)的攻擊。值得關注的是,Jurkat CA 細胞對部分hua療藥物存在固有耐藥性,為研究白血病耐藥機制提供了良好的實驗對象。
培養(yǎng) Jurkat CA 細胞需嚴格遵循標準化操作流程。基礎培養(yǎng)基通常選用含 10% 優(yōu)質胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基,胎牛血清中的多種生長因子、激素和營養(yǎng)物質,能夠充分滿足細胞的生長需求;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,防止細菌污染。將細胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境,維持細胞內的酸堿平衡和酶活性。由于 Jurkat CA 細胞為懸浮生長,當細胞密度達到 5×10? - 1×10?個 /mL 時,需及時進行傳代,傳代時采用離心(1000rpm,5 分鐘)去除舊培養(yǎng)液,用新鮮預熱的培養(yǎng)基重懸細胞,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時,使用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先在 - 80℃冰箱過夜,再轉入液氮中長期保存。在培養(yǎng)過程中,需定期通過臺盼藍染色檢測細胞活力、觀察細胞形態(tài),并利用流式細胞術檢測細胞表面抗原表達情況,確保細胞狀態(tài)穩(wěn)定。
在科研應用領域,Jurkat CA 細胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在白血病發(fā)病機制研究中,科研人員借助基因編輯技術,在 Jurkat CA 細胞中探究基因突變對 T 細胞白血病發(fā)生發(fā)展的影響,發(fā)現 NOTCH1 基因突變與 TCR - CD3 信號通路異常協(xié)同作用,加速正常 T 細胞向白血病細胞的轉化。在藥物研發(fā)方面,Jurkat CA 細胞系是篩選抗白血病藥物的重要工具,新型的靶向 TCR - CD3 信號通路抑制劑、免疫檢查點調節(jié)劑在該細胞系實驗中,能夠有效抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡;針對其耐藥特性開展的聯(lián)合用藥研究,也取得了顯著進展,為克服白血病耐藥問題提供了新策略。此外,Jurkat CA 細胞還廣泛應用于免疫學研究,用于探索 T 細胞激活、分化及免疫調節(jié)機制,推動白血病免yi治療技術的不斷發(fā)展。
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