HHCC人肝癌細胞系
HHCC人肝癌細胞系源自人體肝癌組織，是探究肝癌病理機制、評估抗癌療法的重要工具。在顯微鏡下，HHCC 細胞呈現不規則多邊形或梭形，以貼壁方式緊密生長，細胞間相互連接形成不規則細胞簇，部分區域細胞堆疊成多層結構。細胞胞質豐富，染色后呈嗜酸性，內部線粒體數量激增且形態腫脹，為癌細胞持續增殖供能；內質網與高爾基體異常擴張，大量合成促癌蛋白。細胞核大而畸形，核質比例失調，核仁數目增多，常見異常核分裂象，凸顯其惡性腫瘤細胞特征。
HHCC 細胞的生物學特性du特且復雜。在增殖調控方面，其細胞周期蛋白 Cyclin E、CDK2 表達顯著上調，驅動細胞周期加速運轉，在適宜培養條件下，細胞倍增時間約為 32 - 38 小時。信號通路層面，HHCC 細胞中 Wnt/β-catenin 通路異常激活，β-catenin 蛋白在細胞質中異常累積并轉移至細胞核，激活下游 MYC、CCND1 等基因轉錄，促進細胞增殖；PI3K/AKT 通路持續活化，AKT 磷酸化水平提升 3 倍，通過抑制 Bad 蛋白、激活 mTORC1，增強細胞存活與代謝能力。侵襲轉移特性上，HHCC 細胞分泌的 MMP-2、MMP-9 酶活性分別是正常肝細胞的 5 倍和 7 倍，可快速降解細胞外基質成分；細胞表面整合素 αvβ3 表達量上調 4 倍，協同上皮 - 間質轉化（EMT）過程，促使細胞獲得間質細胞特性，增強遷移和侵襲能力。此外，HHCC 細胞對索拉非尼等肝癌常用治療藥物存在一定耐藥性，為研究肝癌耐藥機制提供了理想樣本。
培養 HHCC 人肝癌細胞系需嚴格遵循規范流程。基礎培養基選用含 10% 優質胎牛血清的高糖 DMEM 培養基，為細胞提供充足的葡萄糖、氨基酸等營養物質，滿足其旺盛代謝需求；添加 1% 青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液，預防細菌污染。將細胞置于 37℃、5% CO?的恒溫培養箱中，模擬人體生理環境，維持細胞內酸堿平衡與酶活性。當細胞匯合度達到 85% 左右時，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液消化細胞，消化時間控制在 2 - 3 分鐘，顯微鏡下觀察到細胞變圓、間隙增大時，立即加入含血清培養基終止消化。通過離心去除舊培養液，用新鮮預熱的培養基重懸細胞，按 1:3 - 1:4 的比例傳代。凍存時，采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液，遵循程序降溫原則，先于 - 80℃冰箱過夜，再轉入液氮中長期保存。培養過程中，定期利用臺盼藍染色檢測細胞活力，通過 Western blot 檢測 AFP、PCNA 等標志物表達，確保細胞特性穩定。
在科研應用領域，HHCC 細胞系成果豐碩。在肝癌發病機制研究中，科研人員利用該細胞系發現，TP53 基因缺失可協同激活 Wnt/β-catenin 通路，加速肝癌細胞惡性轉化。在藥物研發方面，新型 MEK 抑制劑在 HHCC 細胞實驗中，可顯著抑制 ERK 磷酸化，使細胞增殖抑制率達 75%，誘導細胞凋亡率提升至 30%；針對其耐藥特性開展的聯合用藥研究，如索拉非尼聯合 PI3K 抑制劑，能使 HHCC 細胞耐藥性降低 50%，為臨床聯合治療方案提供理論依據。此外，基于 HHCC 細胞構建的 3D 腫瘤球模型，已成功用于評估納米載藥系統對肝癌的靶向治療效果，推動肝癌精準醫療發展。
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