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文獻 | Molecular Plant: 解密水稻半矮桿與應用之謎
文獻|MolecularPlant:解密水稻半矮桿與應用之謎倒伏是影響水稻高產穩產的主要限制因素之一。自20世紀60年代以來,以作物矮化育種為標志的“綠色革命”主要是利用赤霉素合成基因SD1的突變體,培育半矮稈性狀,提高作物(水稻)的抗倒伏能力,使水稻產量得到了大面積的顯著增加。經過多年研究,雖然在水稻中發現了超過60個基因可以導致半矮稈性狀,但這些基因除影響莖稈長度還影響其它農藝性狀,難以應用于培育抗倒伏品種。目前,SD1的突變仍然是培育水稻半矮稈性狀的主要基因。由于單一的可用基因,抗倒伏性狀 -
作為DNA分選磁珠的生產廠商,我們zui經常被客戶問到的問題就是:高通量測序(NGS)文庫制備時,DNA磁珠為什么可以用來純化和分選文庫?在這里我們整理相關的資料,對這個問題做簡單的闡述。分選磁珠的作用原理是基于一種固相載體可逆化固定(SPRI)的分離純化方法。磁珠體系中一般包含:磁珠、DNA、聚乙二醇(PEG)、以及鹽離子等,在一定濃度的PEG和鹽離子環境中,DNA可吸附到羧基修飾的高分子磁珠表面(即固相載體),該過程是可逆的,在適當條件下,結合的DNA分子可以被洗脫回收。納米級別的磁珠表面性
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一、WesternBlot實驗原理蛋白免疫印跡(WesternBlot,WB)是將蛋白質經電泳分離后轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的技術。完整的WB流程,如下圖所示,包含樣本制備、SDS-PAGE、轉膜、抗體結合、蛋白檢測等5個大步驟。二、試劑準備詳見文末附錄。三、實驗步驟1.樣本制備1)融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。2)貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照6孔板每孔加入150-250μ
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1.什么是RIPA裂解液?RIPA裂解液(RadioImmunoprecipitationAssayLysisbuffer,放射免疫沉淀法裂解緩沖液)是一種傳統的可用于裂解細胞或組織的快速裂解液,其原理為利用表面活性劑等裂解細胞膜(包括核膜),從組織或細胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規的WB、IP、co-IP等實驗。2.RIPA裂解液里有什么?RIPA裂解液的配制方法有很多種,主要包括裂解成分、蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑三種組分。裂解成分可通過破壞細胞膜和蛋白
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BenzonaseNuclease高活力核酸酶——消滅核酸,拒絕污染1.前言核酸污染是生物樣本制備中常常遇到的問題。在蛋白純化的過程中,如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白純化的得率很低、蛋白檢測的結果很差,那么您的樣本可能遭受了核酸污染。如何去除核酸?超聲法和DNase/RNase酶法是常用的方法,但存在諸多缺陷(表1)。表1核酸去除,超聲法與DNase/RNase酶法優缺點超聲法DNase/RNase酶法優點利用剪切力可在一定程度上降解核酸利用核酸內切酶活性,可在溫和條件下,較好的消化核酸缺點僅能
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YeaRed無毒核酸染料,您的安全科研助手還有實驗室用EB嗎?拒絕EB!用無毒核酸染料YeaRed!溴化乙錠(Ethidiumbromide,EB)是應用早的的核酸染料,并且由于其價格便宜、靈敏度高,早期被實驗者廣泛應用。但其分子量小,很輕易就能穿透細胞膜,屬于誘變劑,具有高致癌性,對人體潛在危害非常大。實驗者使用時需要謹慎再謹慎,另外,單獨的EB區占用了實驗室的大塊空間,廢膠、廢液的處理費時、費力又費錢,以及不小心碰到EB區的東西可能再也不能重見天日了,真是讓人又愛又恨。隨著技術的發展,人們對
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PeptideHydrogelSuitablefor3DCellCulture——3D多肽水凝膠超越基質膠(matrigel)Yeasen多肽水凝膠產品是由一種由16個氨基酸組成的多肽,在鹽離子存在情況下自發組裝成的水凝膠支架結構。多肽的大小通常在5nm左右,是親水性和疏水性氨基酸殘基交替排列組成的兩性分子肽段,能形成折疊片結構,并自組裝形成納米纖維,這些納米纖維相互交織在一起形成基質并進一步形成含水量超過99.5%的水凝膠支架(見圖1)。Yeasen多肽水凝膠無需通過調節聚合物和交聯劑的量來獲
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關鍵詞:ChromoTek、GFP、RFP、免疫沉淀、IP、抗體、瓊脂糖、磁珠德國ChromoTek公司成立于2008年,擁有德國制造的良好質量,致力于細胞生物學和蛋白質組學的研發與研究,公司擁有強大的研發團隊,有*生物制劑,主要使命是花費較少的時間和成本,使客戶獲得得高質量的實驗數據。產品包括單克隆抗體、重組單域抗體、熒光抗體、GFP或RFP連接蛋白等。德國ChromoTek是一家專業研發生產標簽抗體的公司,利用羊駝抗體的特異性解決了傳統GFP/RFP抗體分子量過大、轉染表達效率低的問題,研發